密理博Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)
在體外細(xì)胞模型研究中,精確評(píng)估細(xì)胞單層的屏障完整性是許多實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟??缒る娮柚档臏y(cè)量為研究上皮或內(nèi)皮細(xì)胞的緊密連接形成與功能提供了直接的量化指標(biāo)。Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)作為一款專(zhuān)為此類(lèi)應(yīng)用設(shè)計(jì)的測(cè)量?jī)x器,為細(xì)胞生物學(xué)和藥理學(xué)研究提供了標(biāo)準(zhǔn)化的評(píng)估工具。
Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)是一套完整的電阻測(cè)量系統(tǒng),其核心功能是精確、便捷地測(cè)量放置在Millicell品牌細(xì)胞培養(yǎng)插入式小室中的細(xì)胞單層的電阻值。該設(shè)備通過(guò)將測(cè)量結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化為跨膜電阻值,幫助研究人員客觀(guān)監(jiān)測(cè)細(xì)胞屏障模型的建立與維持過(guò)程。
一、系統(tǒng)組成與工作原理
該系統(tǒng)通常由讀數(shù)主機(jī)與專(zhuān)用電極兩部分構(gòu)成。主機(jī),即Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)本身,是一個(gè)手持式或臺(tái)式儀表。它內(nèi)置了測(cè)量電路和顯示單元。與之配套的專(zhuān)用電極(如STX01電極)通常為一對(duì),分別用于接觸插入式小室的頂室(apical)和底室(basolateral)中的培養(yǎng)基。
其工作原理基于測(cè)量交流阻抗。儀器通過(guò)電極向培養(yǎng)體系施加一個(gè)微弱且對(duì)細(xì)胞無(wú)害的交流電信號(hào),隨后檢測(cè)由此產(chǎn)生的電壓,并根據(jù)歐姆定律計(jì)算得出電阻值。最終,通過(guò)減去不含細(xì)胞的空白對(duì)照值,并乘以培養(yǎng)膜的有效面積,即可得到標(biāo)準(zhǔn)化的跨膜電阻,用于不同實(shí)驗(yàn)間的比較。
二、主要技術(shù)特點(diǎn)與操作優(yōu)勢(shì)
在日常研究應(yīng)用中,Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)展現(xiàn)出如下特點(diǎn):
測(cè)量便捷性與即時(shí)性:操作流程簡(jiǎn)單快捷,通常能在數(shù)秒內(nèi)完成一次測(cè)量,便于在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中進(jìn)行頻繁、非破壞性的監(jiān)測(cè),從而動(dòng)態(tài)追蹤細(xì)胞屏障的形成與發(fā)展。
設(shè)計(jì)的專(zhuān)用性與兼容性:該系統(tǒng)專(zhuān)為配合Millicell系列插入式小室設(shè)計(jì),電極的尺寸和形狀經(jīng)過(guò)優(yōu)化,確保了測(cè)量的穩(wěn)定性和重復(fù)性。它能良好兼容多種孔徑和材質(zhì)的培養(yǎng)膜。
數(shù)據(jù)的客觀(guān)性與量化:提供具體的歐姆數(shù)值,將細(xì)胞屏障的完整性和致密性轉(zhuǎn)化為可記錄、可比較的量化指標(biāo),相比主觀(guān)的形態(tài)學(xué)觀(guān)察更具客觀(guān)說(shuō)服力。
對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境影響小:整個(gè)測(cè)量過(guò)程快速,且專(zhuān)用電極易于進(jìn)行無(wú)菌處理,有助于維持培養(yǎng)環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài),減少對(duì)細(xì)胞的干擾。
三、典型應(yīng)用領(lǐng)域與場(chǎng)景
該測(cè)量系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于依賴(lài)于體外屏障模型的研究領(lǐng)域,例如:
藥物通透性與轉(zhuǎn)運(yùn)研究:在評(píng)估候選藥物通過(guò)腸道(如Caco-2細(xì)胞模型)、血腦屏障或肺部上皮的滲透能力前,首先需確認(rèn)細(xì)胞單層已形成高完整性的屏障。
細(xì)胞毒性評(píng)估:通過(guò)監(jiān)測(cè)化學(xué)物質(zhì)或藥物處理前后跨膜電阻值的變化,可以間接評(píng)估其對(duì)細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)的潛在損傷。
屏障形成機(jī)制研究:用于研究生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子或特定基因表達(dá)對(duì)細(xì)胞緊密連接組裝與功能的調(diào)節(jié)作用。
組織工程與再生醫(yī)學(xué):在構(gòu)建具有屏障功能的組織工程化模型時(shí),作為質(zhì)量控制的監(jiān)測(cè)指標(biāo)之一。
四、使用注意事項(xiàng)與維護(hù)建議
為確保Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性并延長(zhǎng)設(shè)備使用壽命,建議注意以下幾點(diǎn):
規(guī)范操作流程:測(cè)量前確保電極和插入式小室溫度平衡至培養(yǎng)箱溫度,電極應(yīng)浸入液面下適當(dāng)深度且避免觸碰細(xì)胞層或培養(yǎng)膜側(cè)壁。
必要的背景校準(zhǔn):每次實(shí)驗(yàn)系列開(kāi)始前,需使用僅含培養(yǎng)基的空白插入式小室測(cè)量背景電阻值,并在計(jì)算細(xì)胞單層真實(shí)電阻時(shí)予以扣除。
電極的維護(hù)與清潔:遵循制造商的指導(dǎo),對(duì)電極進(jìn)行適當(dāng)?shù)那鍧?、消毒或滅菌。定期檢查電極表面是否有污染或損壞。
數(shù)據(jù)的合理解讀:跨膜電阻是屏障功能的重要但不是唯丨一指標(biāo)。建議結(jié)合跨膜通透性實(shí)驗(yàn)(如使用熒光黃、FD-4等示蹤劑)進(jìn)行綜合判斷。
總結(jié)
綜上所述,密理博Millicell-ERS3.0伏特歐姆計(jì)作為一種成熟的定量工具,為體外細(xì)胞屏障研究提供了關(guān)鍵的技術(shù)支持。它通過(guò)將細(xì)胞層的生理狀態(tài)轉(zhuǎn)化為可重復(fù)測(cè)量的電學(xué)信號(hào),幫助研究人員優(yōu)化模型建立條件、監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程并獲得可靠的定量數(shù)據(jù),是相關(guān)研究領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室中常見(jiàn)的實(shí)用設(shè)備之一。