Millipore密理博Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0
在細(xì)胞生物學(xué)研究與藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域,體外屏障模型(如血腦屏障、腸道屏障等)的構(gòu)建與評(píng)估是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。這類(lèi)研究中,需要一種能夠客觀、定量評(píng)估細(xì)胞單層完整性與緊密連接狀態(tài)的工具。Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0正是為滿(mǎn)足這一需求而設(shè)計(jì)的專(zhuān)業(yè)儀器,它通過(guò)精確測(cè)量跨膜電阻,為細(xì)胞屏障功能的定量分析提供了標(biāo)準(zhǔn)方法。
Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0是一個(gè)完整的測(cè)量系統(tǒng),專(zhuān)為配合Millicell品牌細(xì)胞培養(yǎng)插入式小室使用而優(yōu)化。其設(shè)計(jì)旨在通過(guò)非侵入性的電學(xué)測(cè)量方式,實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞單層屏障功能的實(shí)時(shí)、定量監(jiān)測(cè),幫助研究人員評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、緊密連接形成程度以及各種處理(如藥物、毒素)對(duì)屏障完整性的影響。
一、核心工作原理與系統(tǒng)構(gòu)成
該系統(tǒng)主要包含一個(gè)手持式或臺(tái)式的讀數(shù)儀主機(jī)(即Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0)和一對(duì)專(zhuān)用測(cè)量電極(通常為STX01型電極)。其工作原理基于交流阻抗測(cè)量法:儀器通過(guò)電極對(duì)培養(yǎng)體系施加一個(gè)微小的交流電信號(hào),并檢測(cè)由此產(chǎn)生的電壓降,然后根據(jù)歐姆定律計(jì)算出電阻值。通過(guò)減去不含細(xì)胞的空白對(duì)照的電阻背景值,并乘以培養(yǎng)膜的有效面積,即可得到標(biāo)準(zhǔn)化的跨上皮/內(nèi)皮電阻值,作為評(píng)估屏障功能的核心量化指標(biāo)。
二、主要技術(shù)規(guī)格與功能特點(diǎn)
Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0系統(tǒng)具備以下特點(diǎn),以滿(mǎn)足細(xì)胞研究中對(duì)測(cè)量穩(wěn)定性和操作便利性的要求:
直接的TER測(cè)量:儀器可直接讀取并顯示電阻值,配合標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算公式,能便捷地獲得跨膜電阻值,結(jié)果客觀、可重復(fù)。
操作簡(jiǎn)便快捷:測(cè)量過(guò)程通常在數(shù)秒內(nèi)完成,支持在培養(yǎng)箱附近進(jìn)行快速檢測(cè),限度減少對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的干擾。
良好的系統(tǒng)兼容性:其專(zhuān)用電極設(shè)計(jì)匹配Millicell系列各種孔徑和膜材質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)插入式小室,確保了測(cè)量的準(zhǔn)確性與一致性。
對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷:采用微弱的交流測(cè)試信號(hào),避免了對(duì)活細(xì)胞的電刺激或損傷,支持對(duì)同一細(xì)胞樣本進(jìn)行長(zhǎng)期動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。
三、典型應(yīng)用場(chǎng)景
該電阻測(cè)量系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于基于體外屏障模型的各類(lèi)研究中:
藥物通透性與轉(zhuǎn)運(yùn)研究:在利用Caco-2細(xì)胞模型評(píng)估口服藥物吸收、或利用血腦屏障模型評(píng)估中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物遞送效率前,必須確認(rèn)細(xì)胞單層已形成高完整性的屏障(表現(xiàn)為高TER值)。
毒理學(xué)與安全性評(píng)估:通過(guò)監(jiān)測(cè)化學(xué)物質(zhì)或環(huán)境毒素暴露后TER值的變化,可以評(píng)估其對(duì)上皮或內(nèi)皮屏障功能的損傷作用。
細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制研究:用于研究細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子或特定基因?qū)?xì)胞間緊密連接組裝、調(diào)控及功能的影響。
組織工程與再生醫(yī)學(xué):在構(gòu)建具有屏障功能的組織工程化模型(如皮膚、角膜等)時(shí),作為評(píng)估模型成熟度和功能質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
四、使用注意事項(xiàng)與日常維護(hù)
為確保Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行并獲得可靠數(shù)據(jù),建議關(guān)注以下幾點(diǎn):
規(guī)范操作:測(cè)量前需將含有細(xì)胞的培養(yǎng)板從培養(yǎng)箱中取出,在潔凈環(huán)境中平衡至室溫。電極應(yīng)垂直、輕柔地放入小室,避免觸碰細(xì)胞單層或膜壁。
背景值校準(zhǔn):每次實(shí)驗(yàn)都必須使用未接種細(xì)胞的空白小室(僅含培養(yǎng)基)測(cè)量背景電阻,并在后續(xù)計(jì)算中扣除,這是獲得準(zhǔn)確TER值的關(guān)鍵步驟。
電極的清潔與保養(yǎng):每次使用后,需用去離子水清潔電極,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)室規(guī)范進(jìn)行消毒或滅菌處理,防止交叉污染。定期檢查電極是否有損壞。
數(shù)據(jù)解讀的綜合性:雖然TER是評(píng)估屏障完整性的重要參數(shù),但通常建議與跨膜通透性實(shí)驗(yàn)(如使用熒光素鈉、辣根過(guò)氧化物酶等示蹤劑)相結(jié)合,對(duì)屏障功能進(jìn)行更全面的評(píng)估。
總結(jié)
總之,Millipore密理博Millicell細(xì)胞電阻儀ERS3.0作為一項(xiàng)經(jīng)典且實(shí)用的細(xì)胞功能分析工具,為體外屏障模型的研究提供了至關(guān)重要的定量支持。其操作的簡(jiǎn)便性、測(cè)量的客觀性以及與標(biāo)準(zhǔn)化耗材的良好兼容性,使其成為許多細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)及毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)配備設(shè)備之一。正確理解和使用該系統(tǒng),能夠?yàn)橄嚓P(guān)研究提供可靠且可重復(fù)的關(guān)鍵數(shù)據(jù)。