密理博Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀
在體外細(xì)胞模型的研究中,尤其是在藥理學(xué)、毒理學(xué)及基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,對(duì)上皮或內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能的準(zhǔn)確評(píng)估至關(guān)重要。細(xì)胞單層的完整性直接關(guān)系到物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞間通訊及屏障的保護(hù)作用。Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀作為一項(xiàng)成熟的定量測(cè)量工具,為研究人員提供了標(biāo)準(zhǔn)化且可重復(fù)的方法,用以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和量化評(píng)估細(xì)胞屏障模型的建立與功能狀態(tài)。
Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀是一套完整的測(cè)量系統(tǒng),其核心價(jià)值在于將細(xì)胞層的生理緊密連接狀態(tài),轉(zhuǎn)化為具體、可追蹤的電阻數(shù)值。它專為配合Millicell品牌細(xì)胞培養(yǎng)插入式小室設(shè)計(jì),通過非侵入性的電學(xué)測(cè)量,實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞單層跨膜電阻的精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)。
一、核心工作原理與標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量流程
該系統(tǒng)主要由兩部分構(gòu)成:讀數(shù)儀主機(jī)(即Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀)和專用的測(cè)量電極對(duì)(如STX01電極)。其工作原理基于交流阻抗技術(shù),能夠在不損傷活細(xì)胞的前提下進(jìn)行測(cè)量。標(biāo)準(zhǔn)操作流程通常包括:將電極分別浸入細(xì)胞培養(yǎng)小室的頂室與底室培養(yǎng)基中,儀器施加微小的交流測(cè)試信號(hào)并檢測(cè)響應(yīng)電壓,從而計(jì)算出總電阻值。最終,通過扣除不含細(xì)胞的背景值,并乘以培養(yǎng)膜的有效面積,即可獲得標(biāo)準(zhǔn)化的跨上皮/內(nèi)皮電阻值,該值是評(píng)估細(xì)胞屏障完整性和致密度的關(guān)鍵量化指標(biāo)。
二、技術(shù)規(guī)格與系統(tǒng)性能特點(diǎn)
Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀的設(shè)計(jì)注重穩(wěn)定性與易用性,其主要性能特點(diǎn)體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
直接量化與高重復(fù)性:該儀器能夠直接輸出以歐姆為單位的電阻讀數(shù)。其穩(wěn)定的測(cè)量性能確保了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)具有良好的重復(fù)性,支持對(duì)同一細(xì)胞樣本進(jìn)行長期、連續(xù)的動(dòng)態(tài)追蹤,對(duì)于繪制生長曲線或評(píng)估處理效果至關(guān)重要。
操作便捷與流程快速:測(cè)量過程通??稍跀?shù)十秒內(nèi)完成,支持研究者在細(xì)胞培養(yǎng)過程中進(jìn)行頻繁、快速的檢測(cè),減少了對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的干擾,簡化了實(shí)驗(yàn)流程。
優(yōu)化的系統(tǒng)兼容性:整套系統(tǒng)專為Millicell系列培養(yǎng)小室優(yōu)化。專用電極的尺寸和形狀設(shè)計(jì)確保了與不同孔徑、不同膜材質(zhì)小室的精準(zhǔn)匹配,保障了測(cè)量的一致性與可靠性。
支持無菌操作與低干擾:電極易于進(jìn)行高溫高壓滅菌或化學(xué)消毒,滿足細(xì)胞培養(yǎng)的無菌要求。微弱的測(cè)試電流對(duì)細(xì)胞活性無影響,實(shí)現(xiàn)了真正的非破壞性監(jiān)測(cè)。
三、在生物醫(yī)學(xué)研究中的核心應(yīng)用
憑借其定量評(píng)估能力,Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀在多個(gè)前沿研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用:
藥物開發(fā)與篩選:在Caco-2腸道吸收模型或血腦屏障模型中,TER值是驗(yàn)證細(xì)胞單層完整性的先決條件,隨后才能進(jìn)行化合物的滲透性和轉(zhuǎn)運(yùn)研究,對(duì)藥物早期篩選具有重要價(jià)值。
毒理學(xué)與安全性評(píng)價(jià):通過監(jiān)測(cè)環(huán)境污染物、納米材料或化學(xué)試劑暴露后TER值的變化,可以客觀評(píng)估其對(duì)生物屏障功能的潛在損傷,是體外毒理學(xué)研究的重要手段。
細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制探索:用于研究生長因子、細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)控劑或基因編輯對(duì)細(xì)胞間緊密連接組裝、維持及功能的調(diào)控機(jī)制。
組織工程與再生醫(yī)學(xué):在構(gòu)建具有屏障功能的工程化組織(如人工皮膚、角膜上皮等)時(shí),TER測(cè)量是評(píng)估其功能成熟度與質(zhì)量的關(guān)鍵質(zhì)量控制指標(biāo)之一。
四、使用規(guī)范與維護(hù)建議
為確保測(cè)量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性并延長設(shè)備使用壽命,建議遵循以下操作與維護(hù)要點(diǎn):
規(guī)范測(cè)量操作:測(cè)量前應(yīng)使培養(yǎng)板在潔凈環(huán)境中平衡至室溫。電極需垂直、輕柔放置,確保浸入液面下適當(dāng)深度,且避免觸碰細(xì)胞層或培養(yǎng)膜側(cè)壁。
嚴(yán)格執(zhí)行背景校準(zhǔn):每次實(shí)驗(yàn)開始前,必須使用含有新鮮培養(yǎng)基的空白小室測(cè)量背景電阻,并在計(jì)算細(xì)胞單層凈電阻時(shí)準(zhǔn)確扣除該值。
重視電極的清潔與保養(yǎng):每次使用后應(yīng)立即用去離子水沖洗電極,并按實(shí)驗(yàn)室規(guī)程進(jìn)行消毒。定期檢查電極表面是否潔凈、完好,避免污染物或損壞影響測(cè)量精度。
結(jié)合多指標(biāo)綜合判斷:跨膜電阻是評(píng)估屏障功能的核心但非指標(biāo)。建議在關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)中,將TER測(cè)量與跨膜通透性實(shí)驗(yàn)(如使用熒光標(biāo)記的葡聚糖或菊粉作為示蹤劑)相結(jié)合,以獲得對(duì)屏障特性更全面的理解。
總結(jié)
總之,密理博Millicell-ERS3.0細(xì)胞跨膜電阻儀作為一項(xiàng)經(jīng)過長期驗(yàn)證的經(jīng)典技術(shù)平臺(tái),為細(xì)胞屏障研究提供了定量化解決方案。它將復(fù)雜的細(xì)胞生物學(xué)狀態(tài)轉(zhuǎn)化為可精確測(cè)量、追蹤和分析的電學(xué)參數(shù),極大地促進(jìn)了相關(guān)領(lǐng)域研究的標(biāo)準(zhǔn)化與科學(xué)化進(jìn)程。對(duì)于致力于藥物遞送、毒性評(píng)估或細(xì)胞間連接機(jī)制研究的實(shí)驗(yàn)室而言,正確并有效地運(yùn)用這一工具,是獲取可靠數(shù)據(jù)、得出堅(jiān)實(shí)結(jié)論的重要基礎(chǔ)。